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除四害公司消毒标准曲线的制备

　　酶B标准曲线的测试操作程序见表2-12。

　　表2-12标准曲线的制备程序

　　管 号012345

　　1%?1.2%底物/mL500500500500500500

　　磷酸 PBS/j^L500480*460440420400

　　37 °C，水浴 3 min?5 min

　　酶B标准液“L

　　摇匀，37 °C，15 min

　　终止剂“L1 0001 0001 0001 0001 0001 000

　　离心10 000 r/min，8 min，取上清以0号管作空白于波长540 nm，l cm光径，狭缝2检测。绘制标 准曲线。用3个不同的标准管，采用相同的浓度连续测定3次，计算同一加样量对应的3个吸光度的平 均值。再作出此底物对应的标准曲线。此曲线可连续使用。底物使用2个?3个月后或更换底物均需重做曲线。

　　4)除四害公司消毒待测溶液酶活性的测定

　　试样经适量稀释，方法步骤与上述标准曲线制作过程相同，加样量一般在100 根据待测溶液

　　的光吸收值(A)-标准曲线上查出对应的酶活性单位数，即可计算出待测溶液的酶活性。

　　5)测定结果的计算

　　试样中溶菌酶的酶活性可按下式计算：

　　式中：C一样品中的酶活性，U/mL;

　　A—本方法检测的酶的含量，U

　　V—实际加样量，mL;

　　X一样品中溶菌酶的含量，%。

　　样品测定也需做3次平行测定。通常3次测定的样品均需分别做3次稀释。3次测定可在同一试验中进行，也可分3次试验进行。

　　6)测定方法的准确度和精密度

　　应用本方法测定酶活性的相对误差<15%，3次测定相对标准偏差不**过±15%。

　　(2)溶葡萄球菌酶的测定方法

　　1) 原理

　　溶葡萄球菌酶的定量检测用比色法，以偶联KNR艳蓝染料的金黄色葡萄球菌菌体死细胞壁为色源底物，根据酶作用过程中定量地释放的带有KNR染料基团的小分子可溶性片段产物，在除去未反应 的不溶性底物后，对反应上清液进行比色测定，以求知酶的活性。此法简便易行，灵敏直观。

　除四害公司消毒影响杀灭微生物效果的因素

　　(1)温度

　　随浓度的增加、温度的升高和作用时间的延长，盐酸聚六亚甲基胍的杀菌作用增加。

　　⑵pH值

　　对其杀菌作用影响不大，pH值在2?11范围之间对其杀灭微生物效果影响不大，pH值偏碱性时 杀菌作用稍强。

　　(3)**物

　　**物对其杀灭微生物的效果有一定的影响，因此，消毒前将物品清洗干净后进行消毒。

　　除四害公司消毒在公共场所消毒中的应用

　　(1) 使用范围

　　在公共场所消毒中，盐酸聚六亚甲基胍主要用于环境物品表面消毒、空气消毒、手、皮肤及创面消 毒、衣物消毒等;也可用于冷却水、洗浴用水、游泳池水、储水容器消毒。

　　(2) 使用方法

　　1) 物体表面消毒

　　公共场所的台面、椅面、扶手等可使用〇. 05%?0. 1%聚六亚甲基胍消毒液擦拭物体表面，作用 5 min0

　　2) 空气消毒

　　用0. 3%?0? 5%的盐酸聚六亚甲基胍消毒液，喷雾消毒室内空气，用量为10 mL/m3，作用60 min。

　　3) 手的消毒

　　用0? 2%?0? 3%聚六亚甲基胍消毒液，搓擦双手，手的卫生消毒，作用1 min。

　　4) 皮肤及创面消毒

　　用0? 1%?0. 2%的盐酸聚六亚甲基胍消毒液，擦拭消毒皮肤，喷洒或冲洗消毒创面。

　　5) 衣物消毒

　　用0. 1%?0. 2%的盐酸聚六亚甲基胍消毒液，浸泡衣物，作用5 min。

　　2.39.6稳定性、*性和对物品的损害

　　聚六亚甲基胍消毒液稳定性好，在室温下存放，有效期至少2 a。2%盐酸聚六亚甲基胍小鼠灌胃的 LD5Q>20. 900 mg/kg。说明为实际*级。2%的盐酸聚六亚甲基胍对于皮肤无刺激。聚六亚甲基胍对各种材料无腐蚀性，可降解，对环境基本无污染。不宜与阴离子表面活性剂混合使用。

　　2.39.7有效含量测定

　　有效含量测定见《医院消毒技术规范》。

　　2.40复合溶葡萄球菌酶消毒剂及其在公共场所消毒中的应用

　　复合溶葡萄球菌酶消毒剂的主要成分为溶葡萄球菌酶(lysostaphin)和溶菌酶(lysozyme)。由于其具有杀菌特异性强、作用条件温和，起效速度快，不易产生耐药菌株，易溶于水，无臭、无味、毒*低，对物品无腐蚀性，对皮肤黏膜无刺激，不易燃烧，使用*等特点，在公共场所消毒中应用于人体皮肤和黏膜、环境及物体表面的消毒。

　　2.40.1理化性质和剂型

　　溶葡萄球菌酶是目前国际上研究得较为成熟的生物工程类杀菌酶。该酶经基因重组后在大肠杆 菌、枯草杆菌及球状芽胞杆菌中得到克隆表达。该酶作用的较适pH值为7?9。活性较适温度为 37 °C，但**过55 °C时酶活力迅速下降。

　　溶菌酶是自鸡蛋清中提取的一种能分解致病菌中黏多糖的碱性蛋白酶，精制品呈椭圆结晶。溶菌 酶是由129个氨基酸残基组成的单一肽链，为4个二硫键等所结合而成螺旋体结构，适宜的pH值 5. 3?6. 4。溶菌酶是一种化学性质较稳定的蛋白酶。当pH值在1.2?11. 3范围内，其结构几乎不变，

　　遇热也较稳定，当pH值在4?7时，经100 °C处理1 min，酶仍保持其活性。

　　复合溶葡萄球菌酶制剂可配制成水溶液，凝胶剂、喷雾剂、膏剂、漱口剂、滴耳剂、洗消剂等，并可通过浸泡、擦拭、冲洗、喷雾和喷洒的方式进行消毒。